Suuren mittakaavan pylväskromatografia
2. kromatografinen sarake (kiertotyyppi)
3. kromatografinen sarake (manuaalinen)
*** Hintaluettelo koko yllä, kysy meiltä saadaksesi
Kuvaus
Tekniset parametrit
LaajamittainenpylväskromatografiaOnko kemiassa, biologiassa, lääketieteessä ja muilla aloilla laajalti käytetty erotus- ja puhdistustekniikka, jota kutsutaan myös kromatografiaksi, on menetelmä orgaanisten tai epäorgaanisten aineiden erottamiselle, joka käyttää jakautumisen tasapainon periaatetta . Tässä menetelmässä kunkin komponentin erottelu toteutetaan useiden jakautumisvaiheen ja uudelleenjakautumisen jälkeen. Periaate perustuu yhdisteiden jakautumiseen nestemäisen faasin ja kiinteän faasin välillä, joka on neste-kiinteä adsorptiokromatografia .
Suuren pylväskromatografian erotteluvaikutukseen vaikuttavat monet tekijät, mukaan lukien paikallaan olevan vaiheen tyyppi ja luonne, liikkuvan vaiheen valinta ja virtausnopeus, sarakkeen koko ja muoto sekä eluentin tyyppi ja keskittyminen . optimoimalla nämä olosuhteet, tehokas erottelu ja puhdistus voidaan saavuttaa . se on tehokas ja relable -erotus ja puhdistamistekniikka, ja sillä on laaja sovellushese, ja siinä on laaja sovellusprosessit, ja siinä on laaja sovellusprosessit, ja siinä on laaja sovellusprosessit, ja siinä on laaja sovellusprosessit, ja siinä on laaja sovellusprosessit ja laaja kentät . optimoimalla käyttöolosuhteet ja valitsemalla sopivan kiinteän vaiheen ja liikkuvan vaiheen, tehokas erottelu ja puhdistus voidaan saavuttaa .
Parametrit



Kromatografian tyypit
Laajamittainen kromatografia kattaa useita erillisiä tekniikoita, joista kukin hyödyntää ainutlaatuisia periaatteita saavuttaakseen kohdemolekyylien . erottamisen ja puhdistuksen ioninvaihto, affiniteetti, koon poissulkeminen ja hydrofobiset vuorovaikutuskromatografia, jokainen on räätälöity erityisiin erottautumiseen, jotka perustuvat molekyyliominaisuuksiin .}}}}}}}}}}
Ioninvaihtokromatografia
Laajasti käytetty kyvylle erottaa molekyylit niiden nettovarauksen perusteella . Tässä tekniikassa paikallaan oleva faasi sisältää varautuneita ryhmiä, jotka ovat vuorovaikutuksessa vastakkaisesti varautuneiden molekyylien kanssa, mikä johtaa differentiaaliseen retentioon ja erotteluun . Tämä menetelmä on erityisen tehokas proteiineille, nukleiinihappoille ja muille ladatuille biomolelloisille.}}}}
Affiniteettikromatografia
Hyödyntää tiettyjä sitoutumisvuorovaikutuksia kohdemolekyylin ja ligandin välillä, joka on immobilisoitu paikallaan olevaan vaiheeseen . Tätä erittäin selektiivistä tekniikkaa käytetään usein proteiinien puhdistamiseen, joilla on korkea spesifisyys, kuten vasta -aineet tai entsyymit, hyödyntämällä niiden ainutlaatuisia sitoutumisaffinaatioita ligandeihin, kuten antigeenit tai substraatit .}}}}}}}}}}
Koon poissulkemiskromatografia
Tunnetaan myös nimellä geelisuodatuskromatografia, erottaa molekyylit niiden koon ja muodon perusteella . suurempia molekyylejä eleteeriä ensin, koska ne suljetaan pois paikallaan olevan vaiheen huokosiin, kun taas pienemmät molekyylit vievät kauemmin, kun ne tunkeutuvat näihin huokosiin . Tämä menetelmä on arvokas molekyylien painon jakautumisen ja puhdistamisproteiinien analysoimiseksi. koko .
Hydrofobinen vuorovaikutuskromatografia
Riippuu hydrofobisuuden eroista molekyylien välillä . Tässä tekniikassa paikallaan oleva faasi sisältää hydrofobisia ligandeja, jotka ovat vuorovaikutuksessa näytteen molekyylien ei -polaaristen alueiden kanssa . molekyylien, joilla on korkeampi hydrofobisuus, on voimakkaampia vuorovaikutuksia ja säilyttävät pidempään, ja ne ovat erotettuja vähemmän hydrofobisuuksista {2).
Jokainen näistä kromatografisista tekniikoista tarjoaa ainutlaatuisia etuja ja valitaan kohdemolekyylien erityisominaisuuksien ja halutun erottelutuloksen . kanssa, ne muodostavat voimakkaan työkalusarjan laaja-alaiseen puhdistukseen ja analyysiin biotekniikassa, lääketieteellisissä aloilla ja muissa teollisuudessa .}}}}}}}}}}}}}}}}
|
|
|
|
sovellukset
Suuren mittakaavan pylväskromatografiaPivotal -rooli useilla toimialoilla hyödynnetään sen kykyä erottaa ja puhdistaa monimutkaiset seokset, joilla on suuri tarkkuus ja tehokkuus . bioteknologia -alalla, tämä tekniikka on välttämätöntä terapeuttisissa sovelluksissa käytettyjen proteiinien puhdistamisessa . esimerkiksi eristämisessä, missä se on eristäviä monoklonia. on kriittinen turvallisuuden ja tehokkuuden varmistamiseksi .
Monoklonaaliset vasta-aineet (MAb) ovat erittäin spesifisiä, laboratoriossa tuotettuja molekyylejä, jotka on suunniteltu jäljittelemään immuunijärjestelmän kykyä tunnistaa ja neutraloida vieraita aineita, kuten viruksia ja bakteereja ., toisin kuin polyklonaaliset vasta-aineet, jotka johdetaan useista immuunisoluista ja joka voi sitoutua erilaisiin epitoopeihin, monokloniaalisiin antibodeihin. B-solut, jotka varmistavat yhdenmukaisuuden ja spesifisyyden sitoutumisessa yhteen epitooppiin .
● Tuotanto ja rakenne
Monoklonaaliset vasta-aineet tuotetaan tyypillisesti hybridoomitekniikan avulla, jossa spesifinen B-solu sulatetaan myeloomasoluun luomalla hybridisolulinjan, joka kykenee jatkuvaan kasvuun ja vasta-ainetuotantoon . Vaihtoehtoisesti rekombinantti-DNA-tekniikka sallii MAB: ien tuotannon in vitro -soluja, kuten kiinanhammikan ovari (Cho) {{2 Suuret, Y-muotoiset proteiinit, jotka koostuvat kahdesta raskaasta ketjusta ja kahdesta kevyestä ketjusta, antigeenien sitoutumispaikoilla, jotka sijaitsevat "y ." kärjissä "
● Sovellukset
Lääketieteessä monoklonaaliset vasta -aineet ovat mullistaneet erilaisten sairauksien hoitostrategioita . niitä käytetään syöpähoidossa kohdistamaan tiettyjä antigeenejä tuumorisoluissa, mikä parantaa immuunivastetta syöpää ., esimerkiksi mAb: ien kaltaisia trastuzumabia (Herceptin) kohde hänen 2- positiivisia rintasyöpäsoluja, parantaa potilaan tuloja {3}.}}}}}}}}}} Positiivisia rintasyöpäsolujaan (Herceptin). Autoimmuunisairaudet, MAb: t voivat moduloida immuunijärjestelmää tulehduksen vähentämiseksi, kuten adalimumabilla (HUMIRA) näkyy nivelreuman .
Monoklonaalisilla vasta -aineilla on myös kriittinen rooli diagnostiikassa, mikä mahdollistaa biomarkkereiden tarkan havaitsemisen sairauksille, kuten HIV, hepatiitti ja tietyt syövät {. niiden korkean spesifisyys tekee niistä korvaamattomia työkaluja tutkimuksessa, helpottamalla soluprosessien tutkimusta ja uusien terapioiden kehittämistä.}}}}}}}}}}}
● Edut ja haasteet
Monoklonaalisten vasta-aineiden ensisijainen etu on niiden korkea spesifisyys, joka minimoi kohteen ulkopuoliset vaikutukset ja parantaa terapeuttista tehokkuutta ., kuitenkin haasteisiin, kuten korkeisiin tuotantokustannuksiin, kylmän varastoinnin tarpeisiin ja mahdolliseen immunogeenisyyteen on puututtava . kehitykseen, mukaan lukien bispesifisten antiBodies-kehitys ja vasta-aineiden kehittäminen. terapeuttiset sovellukset ja niiden farmakokineettisten ominaisuuksien parantaminen .
Kaiken kaikkiaan monoklonaaliset vasta -aineet edustavat nykyaikaisen lääketieteen ja bioteknologian kulmakiviä, jotka tarjoavat kohdennetut hoidot ja diagnostisen tarkkuuden, jotka jatkavat terveydenhuollon . muuttamista .
Lääketeollisuudessa laajamittainen pylväskromatografia on elintärkeää korkean puhtaan aktiivisen lääketieteellisen ainesosan (APIS) . valmistukselle. Tekniikan kyky saavuttaa korkea puhtausaste on ratkaisevan tärkeä tiukkojen sääntelystandardien täyttämiselle ja lääkkeiden laadun ja konsistenssin . varmistamiselle, joka on tehokkaasti erottamalla, että tehokkaasti erottavat kohdekehityksen, joka on tehokkaasti. huumeet .
Bioteknologian ja lääkkeiden lisäksi se löytää sovelluksia elintarvike- ja juomateollisuudesta . sitä käytetään mehujen selventämiseen, ei -toivottujen komponenttien, kuten tanniinien, pektiinien ja mikro -organismien poistamiseen, parantaen siten tuotteen selkeyttä, makua ja säilyvyysaikaa . tämän sovelluksen aloittamisessa. Tuotteet .
Ympäristötieteessä sitä käytetään vedenpuhdistusprosesseihin . Se auttaa saastuttajien ja epäpuhtauksien poistamista vesilähteistä, myötävaikuttamalla puhtaan ja turvallisen juomaveden . tarjoamiseen. Tämä sovellus korostaa tekniikan mahdollisuuksia puuttua ympäristöhaasteisiin ja tukea kestäviä käytäntöjä .}}}}}}}}}}}}}}
Kvantitatiivisten analyysimenetelmien valinta ja soveltaminen



Tärkeänä erotus- ja analysointitekniikkana sarakiromatografiaa on käytetty laajasti lääkynalyysissä, ympäristön seurannassa, elintarviketurvallisuudessa ja muissa kentissä . kvantitatiivisessa analyysissä, on erittäin tärkeää valita sopiva analyyttinen menetelmä kunkin komponentin sisällön määrittämiseksi tarkasti kvantitatiivisen analyysimenetelmän yksityiskohtaisen keskustelun ja 2: n kanssa.
Kvantitatiivisten analyysimenetelmien valinta
Suuressa pylväskromatografiassa yleisesti käytetyt kvantitatiiviset analyysimenetelmät sisältävät pääasiassa normalisoinnin, ulkoisen standardimenetelmän (mukaan lukien vakiokäyrämenetelmä ja yhden pisteen korjausmenetelmä), sisäinen standardimenetelmä ja standardimenetelmä {. Näiden menetelmien valinta riippuu näytteen luonteesta, analyysin tarkoituksesta ja kokeellisista olosuhteista ..
Normalisointimenetelmä on kvantitatiivinen menetelmä, jolla kaikki huippukomponentit summataan 100%. Menetelmä on yksinkertainen ja tarkka, ja se on erityisen sopiva tilanteisiin, joissa kaikki näytteen komponentit voivat virtaa sarakkeesta ja luoda signaaleja ilmaisimessa . Kun kunkin komponentin korjauskertoimet ovat yhdenmukaisia, joka on koko komponentti, joka on hyvä valinta. ilman päällekkäisiä piikkejä, joita voi olla vaikea saavuttaa joissakin monimutkaisissa näytteissä .
Ulkoinen standardimenetelmä on kvantitatiivinen menetelmä piirtämällä vakiokäyrä . Vakiokäyrämenetelmä on valmistaa vertailutuoteratkaisun pitoisuussarja vertailuaineeseen, samoissa kromatografisissa olosuhteissa kuin mitattava komponentti ja vedä standardityökäyrä, jonka piikkipinta -ala tai huippukorkeus . ei muutettava, kun mitataan, kun komponentti mitataan. Ja likimääräistä sisältöä tunnetaan, standardi ratkaisu, joka on mitattavan komponentin sisältöä, käytetään korjaukseen . Ulkoista standardimenetelmää on helppo käyttää ja soveltuu suurten näytteiden määrien analysointiin, mutta näytteen koon ja operaattorin korkeat vaatimukset ja tulos on helppo olla tarkistanut käyttövirhe .}}}}}}}}}
Sisäinen standardimenetelmä on menetelmä, joka valitsee sopivan aineen mitattavan komponentin viitteenä, lisää sen näytteeseen kvantitatiivisesti ja suorittaa kvantitatiivisen analyysin mitattavan komponentin vastearvon suhteen ja ilmaisimen viitteen ja lisätyn standardin mukaisen standardin mukaisen standardin merkityksen, joka on olemassa olevan sisäisen standardin, määrän määrän määrän perusteella. Mitattava komponentti ei reagoi testatun näytteen kanssa, ja se voidaan kokonaan liuottaa testatussa näytteessä . Sisäisellä standardimenetelmällä on suuri tarkkuus ja se voi korjata näytteen määrän muutoksen ja kromatografisten olosuhteiden pienen muutoksen vaikutuksen määritystuloksissa ., on kuitenkin vaikea valita asianmukainen sisäinen standardi, ja sisäinen standardi on kuitenkin punnitava tarkkaan ja toimenpiteena ja toimenpiteena on, että toimenpide on. hankala .
Standardilisämenetelmä on olennaisesti erityinen sisäinen standardimenetelmä, jonka on otettava mitattavan komponentin puhtaan aineen sisäisenä standardina lisättävänä näytteen mitattaessa, kun sopivaa sisäistä standardia ei ole valittu, ja määritä sitten samassa kromatografisessa olosuhteessa . Menetelmä ei tarvitse toinen standardimateriaali kuin sisäinen standardi. on yksinkertainen . Kuitenkin vaaditaan, että kahden kromatografisen mittauksen kromatografiset olosuhteet ennen mitattavien komponenttien lisäämistä ja sen jälkeen ovat täsmälleen samat varmistaakseen, että kahden mittauksen korjauskertoimet ovat täsmälleen yhtä suuret .}}}}}}}}}}}}
Suuren pylväskromatografian kvantitatiivisen analyysimenetelmän soveltaminen
Suuressa pylväskromatografiassa kvantitatiivisen analyysimenetelmän valinta tulisi määrittää näytteen luonteen ja analyysin {. tarkoituksen . mukaisesti, sisäistä standardimenetelmää tai standardi -lisäysmenetelmää käytetään usein parantamaan määrityksen tarkkuutta lääkekomponenttien monimutkaisuudesta ja suurista sisältöeroista . -sovelluksen koon ja elintarviketurvallisuuskokojen koon ja elintarvikkeiden koon kohteena olevien alojen kanssa. Menetelmää, erityisesti yhden pisteen korjausmenetelmää, käytetään laajasti sen yksinkertaisen toiminnan . vuoksi
Lisäksi seuraavat kohdat on huomattava käytännön sovelluksissa:
Valitse oikea sarake ja pakkaus: Valitse oikea sarake ja pakkaus näytteen luonteen ja analyysin tarkoituksen mukaisesti parantaaksesi erotusvaikutusta ja määritystarkkuutta .
Kromatografiset olosuhteet optimoivat: Säätämällä liikkuvan vaiheen ja muiden kromatografisten olosuhteiden koostumus, osuus ja virtausnopeus optimoi erotteluvaikutus ja määrittämisherkkyys .
Kokeellisten olosuhteiden tiukka hallinta: Koeolosuhteet, kuten lämpötila ja kosteus
Säännöllinen välineiden ylläpito ja kalibrointi: Kromatografisten instrumenttien säännöllinen ylläpito ja kalibrointi vakaan ja luotettavan suorituskyvyn varmistamiseksi .
periaate
Laajamittainen pylväskromatografia toimii näytteen komponenttien differentiaalisen siirtymisen periaatteessa, kun ne ovat vuorovaikutuksessa paikallaan olevan vaiheen kanssa, kun sitä kuljetetaan liikkuvalla vaiheella sarakkeen . Tämä kromatografinen tekniikka on keskeinen biologisten molekyylien ja muiden yhdisteiden erottamis- ja puhdistamisessa.}}}}}}
Kiinteä vaihe, joka koostuu usein huokoisista helmistä tai hartsimateriaaleista, tarjoaa laajan pinta -alan, joka helpottaa vuorovaikutuksia näytteen molekyylien kanssa . Nämä vuorovaikutukset voivat perustua erilaisiin fysikaalis -kemiallisiin ominaisuuksiin, kuten koko, varaus, hydrofobisuus tai erityiset sitoutumisaffinitiot . Valintavaiheessa oleva valinta on kriittinen. prosessi .
Siirrettävä vaihe, tyypillisesti nestemäinen liuotin tai puskuri, palvelee näytteen kuljettamista sarakkeen . läpi, kun näytekomponentit liikkuvat sarakkeen läpi, he kokevat erilaisia säilytysaikoja riippuen niiden vuorovaikutuksesta paikallaan olevan vaiheen kanssa ., joilla on voimakkaampi vuorovaikutus kiinteän vaiheen kanssa, kun taas kiinteän vaiheen kanssa, kun heikkompi vuorovaikutukset eluoivat Faster .}}}}}}}}}}}
Tämä differentiaalinen siirto johtaa näytekomponenttien erottamiseen niiden yksittäisten ominaisuuksien perusteella ., esimerkiksi ioninvaihtokromatografiassa ionit erotetaan niiden varauksen perusteella, kun taas koon poissulkemiskromatografia tapahtuu erottelu tapahtuu molekyylin koon mukaan . kyky räätälöidä paikallaan oleva ja mobiili -faasit sallii versionsuojaimien sovellusten, mukaan ja kemiallinen valmistus .
Innovaatiot ja tulevat trendit
|
|
Simuloitu liikkuva sängyn (SMB) kromatografia Periaate: Käyttää useita sarakkeita jatkuvassa silmukassa vastavirtavirtauksen simuloimiseksi, saannon ja liuotintehokkuuden parantamiseksi . Sovellus: Kiraalisten yhdisteiden puhdistaminen (E . g ., ibuprofen enantiomeerit) . Jatkuva kromatografiaEdut: Vähentää liuotinkäyttöä 50%. Lisää tuottavuutta 3 - 5- fold . Tapaus: GSK käyttää jatkuvaa kromatografiaa HIV -lääkkeiden valmistukseen . MembraanikromatografiaPeriaate: Käyttää huokoisia kalvoja, joissa on immobilisoidut ligandit nopeaan, korkean virtauksen erotteluihin . Sovellus: Biopharmaceuticals (E . g ., viruksen poisto) kiillotusvaiheet . Keinotekoinen äly (AI) menetelmän kehittämisessäTyökalut: Koneoppimisalgoritmit ennustavat optimaaliset kaltevuudet, virtausnopeudet ja hartsityypit . Tapaus: Merck käyttää AI: tä vähentääkseen kromatografian kehittämisaikaa 40%. |
Suositut Tagit: Laajamittainen pylväskromatografia, Kiinan suurimpi pylväskromatografiavalmistajat, toimittajat, tehdas
Seuraava
MonipylväskromatografiaLähetä kysely















