HPLC-analyysin soveltaminen kiertohaihduttimessa

Korkean erotuskyvyn nestekromatografiaa (HPLC) kutsutaan myös korkeapainenestekromatografiaksi, suurnopeusnestekromatografiaksi, korkearesoluutioiseksi nestekromatografiaksi ja nykyaikaiseksi pylväskromatografiaksi. Se on 1970-luvulla nopeasti kehittynyt tehokas ja nopea analyyttinen erotustekniikka, ja se on tärkeä väline nykyaikaisessa erotustestauksessa.

Korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC) käyttää nestettä liikkuvana faasina ja käyttää korkeapaineista infuusiojärjestelmää liikkuvan faasin, kuten yksittäisen liuottimen, jolla on eri polariteetti, tai sekoitettua liuotinta ja puskuriliuosta eri suhteilla, pumppaamiseksi kromatografiseen pylvääseen, jossa on kiinteä faasi. Kun kolonnin komponentit on erotettu, ne menevät ilmaisimeen havaitsemista varten näytteen analyysin toteuttamiseksi.

Korkean suorituskyvyn nestekromatografian erotusmekanismi on sama kuin tavanomaisessa pylväskromatografiassa, mutta pakkaus on hienompi ja sitä on työnnettävä korkeapainepumpulla, jolla on korkea kolonnin tehokkuus ja nopea analyysinopeus. Toisin kuin kaasukromatografiassa, myös nestekromatografiassa liikkuva faasi osallistuu komponenttien erotusprosessiin ja sen koostumusta, suhdetta ja pH-arvoa voidaan säätää joustavasti erilaisilla erotustavoilla. Käytännössä näytteiden retentioarvoa ja selektiivisyyttä kromatografisessa kolonnissa säädetään muuttamalla liikkuvan faasin koostumusta siten, että eri näytteet voidaan erottaa.

 

HPLC-analyysin komponentit

 

Sarake: Kolonni on HPLC-järjestelmän ydinkomponentti, jota käytetään näytteen yhdisteiden erottamiseen. Yleisiä erotuskolonneja ovat käänteisfaasikolonni, ioninvaihtokolonni, geelisuodatuskolonni jne., ja niiden valinta riippuu erotettavan yhdisteen ominaisuuksista ja analyysin tarkoituksesta.

Mobiilivaihe: Liikkuva faasi on liuottimien yhdistelmä, jota käytetään HPLC:ssä näytteen kuljettamiseen erotuskolonnin läpi. Liikkuva faasi koostuu yleensä liuottimien seoksesta, joka voi olla yksi liuotin tai useiden liuottimien seos tietyssä suhteessa. Sopivan virtauksen valitseminen on erittäin tärkeää erotusvaikutuksen kannalta.

Pumppu: Pumppua käytetään tuottamaan liikkuva faasi ja työntämään se erotuskolonnin läpi tietyllä paineella. Yleisiä pumppuja ovat vakiopainepumppu ja gradienttipumppu. Gradienttipumppu voi toteuttaa lineaarisen tai epälineaarisen muutoksen liikkuvan faasin koostumuksessa paremman erotusvaikutuksen saavuttamiseksi.

Injektori: Injektoria käytetään analysoitavan näytteen syöttämiseen HPLC-järjestelmään. Näytteenottolaite voi olla käsikäyttöinen ruisku tai automaattinen näytteenottolaite. Niillä on yleensä tarkan tilavuuden ja hyvän toistettavuuden ominaisuudet tarkan näytteen injektion varmistamiseksi.

Pylväsuuni: Kolonniuunia käytetään erotuskolonnin lämpötilan säätelyyn. Lämpötilaa säätämällä voidaan muuttaa kolonnissa olevan näytteen jakautumiskerrointa ja erotusnopeutta, mikä optimoi erotusvaikutuksen.

Ilmaisin: Ilmaisinta käytetään erotetun yhdisteen havaitsemiseen ja sen pitoisuuteen liittyvän sähköisen signaalin tuottamiseen. Yleisiä ilmaisimia ovat ultraviolettisäteilyn absorptioilmaisin, fluoresenssidetektori ja sähkökemiallinen ilmaisin. Ilmaisimen valinta riippuu analysoitavan yhdisteen ominaisuuksista ja havaitsemisherkkyysvaatimuksista.

Tiedonhankintajärjestelmä: Tiedonkeruujärjestelmää käytetään ilmaisimen lähettämien signaalien vastaanottamiseen, tallentamiseen ja analysointiin. Se voi muuntaa havaitun signaalin parametreiksi, kuten huippupinta-alaksi ja retentioajaksi, ja tarjota tulosten analyysin ja tulkinnan.

 

Kun liuotin on poistettupyörivä höyrystin, saatu näyte on yleensä konsentroitu tai kiinteä. Jos haluat edelleen analysoida tai havaita näytteen yhdisteitä, voit analysoida ne korkean erotuskyvyn nestekromatografialla (HPLC).

Yleiset vaiheet näytteiden analysoimiseksi pyöröhaihdutuksen jälkeen HPLC:llä

 

1. Näytteen liuotus: liuotetaan näyte kiertohaihdutuksen jälkeen sopivaan liuottimeen. Liuottimia valittaessa tulee ottaa huomioon analysoitavan aineen liukoisuus ja HPLC-analyysiolosuhteiden vaatimukset.

2. Standardiliuoksen valmistus: Jos kvantitatiivinen analyysi on tarpeen, testattavan yhdisteen standardiliuos voidaan valmistaa myöhempää korjausta ja analyysitulosten laskemista varten.

3. Suorita HPLC-analyysi: ruiskuta näyte HPLC-järjestelmään ja asenna sopiva erotuskolonni, liikkuva faasi ja detektori. Valitse analyysin tarkoituksen mukaan sopivat menetelmät ja parametrit, kuten virtausnopeus, lämpötila ja gradienttiohjelma.

4. Tiedonkeruu ja analyysi: näytteen kromatogrammi kerätään HPLC-järjestelmällä ja kohdeyhdiste kvantifioidaan tai tunnistetaan piikin alueen, retentioajan tai muiden asiaan liittyvien parametrien mukaan. Kvantitatiiviseen analyysiin voidaan käyttää standardikäyrämenetelmää ja sisäistä standardimenetelmää.

5. Tulosten tulkinta: Analyysitulosten mukaan näytteen yhdisteet arvioitiin kvalitatiivisesti ja kvantitatiivisesti. Tarpeen mukaan voit luoda raportteja tai tallentaa analyysituloksia.

 

Rotahaihduttimen käytöllä HPLC-analyysissä on kaksi käytännön merkitystä

 

• Näytepitoisuus: Joissakin tapauksissa analysoitavan näytteen pitoisuus voi olla liian alhainen, joten kemiallista pyöröhaihdutinta voidaan käyttää näytteen väkevöimiseen analyytin havaitsemisherkkyyden lisäämiseksi HPLC:ssä.
• Liuottimen poisto: Joissakin näytteissä liuottimet voivat häiritä HPLC-analyysiä, joten näytteissä olevat liuottimet on poistettava tai korvattava HPLC:hen sopivilla liuottimilla. Laboratorion pyöröhaihdutin voi auttaa poistamaan liuottimen ja muuttamaan näytteen HPLC-analyysiin sopivaan muotoon.

 

HPLC-analyysi japyörivä höyrystinovat kaksi yleisesti käytettyä tekniikkaa kemiallisessa analyysissä, ja niillä on joitain eroja ja yhteyksiä periaatteessa ja sovelluksessa.

 

Ero

 

Periaate: HPLC perustuu nestekromatografian periaatteeseen, ja erotus ja kvantitatiivinen analyysi toteutetaan kiinteän faasin (kolonni) ja liikkuvan faasin (liuotin) välisellä vuorovaikutuksella. Höyrystin käyttää kuumennus- ja pyöritysperiaatetta nestemäisen näytteen nopeaan haihduttamiseen ja liuottimen poistamiseen näytteen konsentroimiseksi tai näytteen liuotinympäristön muuttamiseksi.

Sovelluskenttä: HPLC:tä käytetään laajalti kemiassa, apteekissa, ympäristössä ja muilla aloilla, ja sitä voidaan käyttää yhdisteiden erottamiseen, tunnistamiseen ja kvantitatiiviseen analyysiin monimutkaisissa seoksissa; Pyörivää haihdutusta käytetään pääasiassa näytteen väkevöimiseen, liuottimen poistoon ja näytteen valmisteluun, ja sitä käytetään yleisesti orgaanisessa synteesissä, luonnontuotteiden uutossa, näytteen valmistelussa ja muilla aloilla.

Analyysin nopeus: HPLC-analyysi kestää yleensä kauan näytteiden erottamiseen ja havaitsemiseen, mikä voi kestää useista minuuteista useisiin tunteihin; Tyhjiökiertohaihdutusyksikkö pystyy haihduttamaan nestemäiset näytteet nopeasti lyhyessä ajassa, yleensä vain muutaman minuutin ajan.

 

Kytkeä

 

Näytehoito: Pyörivää haihdutuslaitetta käytetään usein näytteiden konsentroimiseen tai liuottimien poistamiseen näytteen valmistuksen aikana, jotta näytteet soveltuvat muihin analyysimenetelmiin, kuten HPLC:hen. HPLC-analyysin vaikutusta ja tarkkuutta voidaan parantaa konsentroimalla näyte ja poistamalla liuotin pyöröhaihduttimella.

Liuottimen valinta: HPLC-analyysissä liuottimen valinta on erittäin tärkeä erotusvaikutuksen kannalta; Thepyörivä höyrystinvoi auttaa poistamaan liuottimen näytteestä ja muuttamaan näytteen HPLC-analyysiin sopivaan muotoon. Siksi pyöröhaihdutin voi tarjota tyydyttävät liuotinolosuhteet HPLC-analyysiä varten.

 

Tarjoamme manuaalisen nostohaihduttimen ja sähköisen nostohaihduttimen, ota yhteyttäsales@achievechem.comräätälöidä oma pyörivä haihdutuskone.