Klassinen pylväskromatografia

Klassinen pylväskromatografia, joka tunnetaan myös nimellä nestemäisen ja kromatografia, on tekniikka liuenneiden aineiden erottamiseksi, joka perustuu jakautumiseron (yleensä kiinteän adsorbentin) ja liikkuvaan vaiheen (liuotin) ., perusperiaate voidaan tiivistää seuraavasti: Kiinteän vaiheen avulla liuoksen liuotetun disteenoidun osuus on erottunut ja sitten erottelu. Kertoimet kiinteän vaiheen ja liikkuvan vaiheen välillä .

Pylväskromatografiassa kiinteä vaihe koostuu yleensä huokoisista hiukkasista (kuten silikageelistä, alumiinioksidista, aktivoidusta hiilestä jne. .), jolla on suuri erityinen pinta -ala ja adsorptiokeskus, ja se voi muodostaa vety -sidoksia liuenneen molekyylien, van der Waals -voimien ja muiden vuorovaikutusten aiheuttamista adsorptiosta . -vaiheessa. Molekyylit kiinteästä vaiheesta, ja sen valinta tulisi määrittää liuenneen aineen napaisuuden ja adsorbentin . adsorptioominaisuuksien mukaan .

Erotusprosessissa seosliuos otetaan käyttöön sarakkeessa, joka sisältää paikallaan olevan vaiheen . liikkuvan vaiheen virtauksella, komponentit liikkuvat sarakkeesta eri nopeuksilla johtuen paikallaan olevan vaiheen eri adsorptiokyvystä, jota enemmän polaarikomponentteja on yleensä helppo mukauttaa paikan vaiheen kanssa, joten ne liikkuvat hitaasti . -sarjan kanssa, joten.}, joka on hitaasti., kun komponentti on hitaasti .. se on helposti kuljettavassa vaiheessa, ja liikkuva nopeus on nopeampi . tällä tavalla, jokainen komponentti muodostaa useita värikaistoja sarakkeessa erottelun saavuttamiseksi .

► johdannaisen hoidon tarkoitus
Johdannaisen päätarkoitus on muuttaa analyyttien fysikaalis -kemiallisia ominaisuuksia siten, että ne soveltuvat paremmin erottamiseen ja havaitsemiseen sarauskromatografialla . Erityisesti johdannainen prosessointi voi saavuttaa seuraavat tavoitteet:

1) Parannettu havaitsemis suorituskyky: Esittelemällä funktionaalisia ryhmiä, jotka on helppo havaita, analyytti tuottaa vahvemman signaalin ilmaisimessa, parantamalla havaitsemisen herkkyyttä ja tarkkuutta .
2) Muuta molekyylirakennetta tai napaisuutta: Säädä analyytin polaarisuus sen erottamisen parantamiseksi pylväässä ja vähentämään huipun jäljittämistä ja päällekkäisyyttä .
3) Lisääntynyt volatiliteetti: Joillekin haihtumattomille analyytteille johdannainen voi parantaa niiden haihtuvuutta, mikä helpottaa niiden erottamista ja havaitsemista kaasukromatografiassa .
4) Stabiilin analyytti: Analyytin herkät funktionaaliset ryhmät voidaan suojata johdannaisella hajoamisen tai muutoksen estämiseksi erottelun ja havaitsemisen aikana .

► johdannaisen hoidon tyyppi
Johdannainen jaetaan pääasiassa kahteen tyyppiin: pre-pylvään johdannaisaatio ja pylvään jälkeinen johdannainen:

1) Pre-pylväsjohdannainen:
Ennen kuin analyytti tulee pylvääseen, se reagoi kemiallisesti johdannaisten kanssa johdannaisten tuottamiseksi .
Sitten johdannaiset erotetaan ja havaitaan sarakkeessa .
Prevälumman johdannaisella on vapaiden reaktio-olosuhteiden etuja ja helppo monivaiheinen reaktio, mutta se voi myös tuoda esiin epäpuhtauksia tai menettää näytteitä .
2) Sarakkeen johdannainen:
Analyyttit erotetaan ensin kromatografisessa pylväässä ja reagoivat sitten kemiallisesti johdannaisten solun johdannaisten kanssa .
Tuloksena olevat johdannaiset syötetään sitten ilmaisimeen havaitsemista .

Pylvään jälkeinen johdannainen on hyvä toistettavuus ja vähemmän vaikuttavia tekijöitä, mutta se vaatii lisäinstrumentteja ja laitteita .
► Sovellusesimerkit johdannaisen prosessoinnista
Luonnollisten farmaseuttisten kemiallisten komponenttien uuttamisessa ja erottamisessa se yhdistettynä johdannaisen prosessointitekniikkaan voi saavuttaa seuraavat sovellukset:

1) Parannettu havaitsemisherkkyys: Esimerkiksi aminohappoanalyysissä helposti havaittavissa olevien funktionaalisten ryhmien (kuten fluoroforien) käyttöönotto pre-pylvään johdannaisaatiossa voi lisätä ilmaisimen aminohappojen signaalin voimakkuutta parantaen siten havaitsemisen herkkyyttä . . herkkyyttä .}}}}
2) Paranna erotusvaikutusta: joillekin yhdisteille, joilla on samanlainen polaarisuus tai samanlainen rakenne, napaisuutta voidaan säätää johdannaiskäsittelyllä siten, että kromatografiseen sarakkeen erotusvaikutukseen voidaan parantaa . esimerkiksi flavonoidien analysointiin, erilaiset funktionaaliset ryhmät voidaan ottaa käyttöön johdannaishoidon avulla, siten säätämällä niiden napaisuutta ja parantaa erotteluvaikutusta {2
3) Herkän funktionaalisten ryhmien suojaaminen: Analyytteille, jotka sisältävät herkät funktionaaliset ryhmät (kuten fenolihydroksyyli, amino jne. .), johdannainen voi suojata näitä funktionaalisia ryhmiä hajoamisesta tai muutoksesta erottelun ja havaitsemisen aikana . Esimerkiksi hiilihydraattianalyysissä estämisessä. Hydroksyylifunktionaaliset ryhmät voidaan suojata aseensa estämisessä Erotus .